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穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選技術(shù)服務(wù)

穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選技術(shù)服務(wù)

簡要描述:
穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選技術(shù)服務(wù):穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株(穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株)指在細(xì)胞中持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)特定基因或干擾特定基因表達(dá)。穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的目的基因質(zhì)粒DNA整合到細(xì)胞染色體上,使細(xì)胞長期穩(wěn)定表達(dá)該基因。

更新時間:2024-09-26

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廠商性質(zhì):其他

穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選技術(shù)服務(wù)



穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選技術(shù)服務(wù)目的:

 穩(wěn)轉(zhuǎn)株長用于基因研究方向,便于長期觀察和檢驗基因?qū)τ诩?xì)胞功能以及蛋白的相互作用。

一般轉(zhuǎn)染實驗方法:

用轉(zhuǎn)染質(zhì)粒或病毒侵染的方法將構(gòu)建好的含靶基因的載體導(dǎo)入細(xì)胞,根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的試劑進(jìn)行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎(chǔ)上,得到單細(xì)胞長出的陽性單克隆,繼而得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

一般篩選方法:

1、轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩(wěn)定細(xì)胞系

對大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較低。對于基因過表達(dá),如果轉(zhuǎn)染效率達(dá)到40%,基因過表達(dá)尚可。但是對于基因干擾實驗,對轉(zhuǎn)染效率要求遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于基因過表達(dá),通常質(zhì)粒轉(zhuǎn)染無法滿足。

另外,質(zhì)粒游離于細(xì)胞質(zhì)中,很快降解,無法滿足較長時間的檢測項目;質(zhì)粒轉(zhuǎn)染整合幾率極低,穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建耗時耗力,且得率很低,往往需要挑取單克隆株。

2、病毒感染篩選穩(wěn)定細(xì)胞株

病毒感染方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩(wěn)定細(xì)胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,由于其高效整合、高效轉(zhuǎn)錄、高效表達(dá)、宿主范圍廣,感染效率高,且與細(xì)胞染色體整合而不發(fā)生基因重排,是制備穩(wěn)定細(xì)胞株的理想載體。




服務(wù)內(nèi)容:1、穩(wěn)定:15代以內(nèi)細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)。

      2、迅速:一般控制在1個月以內(nèi)完成構(gòu)建。

      3、經(jīng)濟(jì):價格實惠。

      4、質(zhì)量:對外源基因進(jìn)行嚴(yán)格鑒定。

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團(tuán)隊主要來自大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點高校及科研機(jī)構(gòu),能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。





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